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病毒包裝

1. 慢病毒包裝

      慢病毒(Lentivirus)載體是在HIV-1病毒基礎(chǔ)上改造而成的病毒載體系統(tǒng),該載體的毒性基因已經(jīng)被剔除,可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)的效果。區(qū)別于一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,它對(duì)于分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力??捎行У馗腥旧窠?jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞,在基因治療、藥物研究等方面具有廣泛應(yīng)用。

      萬類生物可進(jìn)行mRNA、lncRNA、microRNA以及circRNA的干擾與過表達(dá)慢病毒包裝,嚴(yán)格把控基因設(shè)計(jì)、載體構(gòu)建、慢病毒包裝的每一環(huán)節(jié),最終提供目的基因慢病毒1mL,并保證病毒滴度達(dá)到1×108TU/mL。

包裝優(yōu)勢(shì):

(1)感染范圍廣:可有效感染分裂和非分裂的細(xì)胞,特別適合質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染效率低的細(xì)胞;

(2)表達(dá)時(shí)間長(zhǎng):可將外源基因整合到宿主細(xì)胞基因組上,實(shí)現(xiàn)目的基因長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定表達(dá),是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的首選;

(3)免疫原性低,安全性高。



2. 腺病毒包裝

      腺病毒(Adenovirus)是一種無包膜的線性雙鏈DNA病毒,對(duì)分裂期細(xì)胞和非分裂期細(xì)胞均具有感染能力,其復(fù)制不依賴于宿主細(xì)胞的分裂。腺病毒載體可攜帶大容量的基因片段,且感染細(xì)胞時(shí)不會(huì)整合到染色體中,安全性高,在基因治療、基礎(chǔ)生命科學(xué)等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。

      萬類生物可進(jìn)行mRNA、lncRNA以及microRNA的干擾與過表達(dá)腺病毒包裝,以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA為骨架,對(duì)克隆、包裝、擴(kuò)增等各部分條件進(jìn)行優(yōu)化,具有克隆陽性率高、質(zhì)量可靠、包裝穩(wěn)定、出毒迅速、滴度高等特點(diǎn),病毒滴度可達(dá)1×109pfu/mL,可滿足各類實(shí)驗(yàn)的需求。

包裝優(yōu)勢(shì):

(1)宿主范圍廣:幾乎可以感染所有類型的細(xì)胞,包括分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞;

(2)病毒滴度高:可產(chǎn)生滴度為1×109pfu/mL的病毒,能夠高效率感染細(xì)胞;

(3)包裝容量大:可插入大于3kb外源基因片段;

(4)感染細(xì)胞時(shí),不整合到染色體中:不存在激活致癌基因或插入突變等危險(xiǎn),生物安全性高;

(5)腺病毒具有嗜上皮細(xì)胞特性:因大多數(shù)腫瘤細(xì)胞均屬于上皮細(xì)胞,這使得腺病毒非常適合應(yīng)用于基因治療領(lǐng)域。


3. 腺相關(guān)病毒包裝

      腺相關(guān)病毒(Adeno-Associated virus,AAV)屬于微小病毒科,是一種無包膜的單鏈線狀DNA病毒,對(duì)分裂和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。重組腺相關(guān)病毒(rAAV)是利用AAV2型基因組與不同血清型的衣殼蛋白基因組結(jié)合產(chǎn)生的混合體病毒載體,具有AAV2型的穩(wěn)定表達(dá)和基因整合能力,同時(shí)也獲得了不同血清型的組織感染嗜親性,表現(xiàn)出一定的器官靶向性。且感染溫和,免疫原性小,擴(kuò)散性良好,安全性高,主要應(yīng)用于動(dòng)物體內(nèi)注射。

      萬類生物可進(jìn)行mRNA、lncRNA以及microRNA的干擾與過表達(dá)腺相關(guān)病毒包裝,具有高滴度、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn),病毒滴度可達(dá)1×1012VG/mL。

包裝優(yōu)勢(shì):

(1)表達(dá)時(shí)間長(zhǎng):rAAV在細(xì)胞分裂不旺盛的組織中可持續(xù)表達(dá)3-6個(gè)月以上;

(2)特異性強(qiáng):rAAV不同的血清型對(duì)不同的臟器有較高的識(shí)別及感染能力,包含中樞神經(jīng)、肌肉、心臟、肺、肝臟、眼、腦組織等,是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的首選;

(3)擴(kuò)散性強(qiáng):rAAV的體積小、滴度高,具有遠(yuǎn)高于腺病毒和慢病毒的擴(kuò)散性,可以穿透血腦屏障,是最理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞感染工具;

(4)宿主范圍廣:能感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞;

(5)安全性高:迄今為止未發(fā)現(xiàn)野生型AAV對(duì)人體致病,重組AAV基因序列上去除了大部分的野生AAV基因組元件,進(jìn)一步保證了安全性;

(6)免疫原性低:便于用常規(guī)的重組DNA技術(shù)進(jìn)行操作,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中局部大劑量使用極少造成非特異性反應(yīng)與免疫抑制;

(7)物理性質(zhì)穩(wěn)定:在60℃不能被滅活,能抗氯仿。



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